改善多参数流式细胞术中 数据变异系数

改善多参数流式细胞术中 数据变异系数技术难点  从临床检测到与 Covid-19 相关的免疫学研究,都要求流式细胞仪可以提供更多参数。 遗憾的是,流式细胞术是一种基于统计学的方法。

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改善多参数流式细胞术中 数据变异系数

  技术难点

  从临床检测到与 Covid-19 相关的免疫学研究,都要求流式细胞仪可以提供更多参数。 遗憾的是,流式细胞术是一种基于统计学的方法。 细胞内的自然变化以及和各细胞相结合的每一种荧光染料数量的自然浮动,都意味着所绘制的数据是“点云”而非单个点。 因此,想实现准确的计数,必须尽一切办法来缩小数据的变异系数(CV 或 rCV),以减少点云的重叠。

  解决方案

  相干公司提供的 OBIS 系列智能型激光器从两个不同的角度,来支持在低变异系数前提下参数数量的增加。 首先,此类激光器因其低噪声、优异的光束质量及出色的指向稳定性,有着极其出色的信噪比 (SNR)。 这是一个关键优势,因为激光器的信噪比直接影响数据噪声,从而影响总体数据变异系数。 其次,这些激光器采用了多种不同的技术,现在可以提供 30 多种不同的波长。 特别值得一提的是,新的紫外和近红外波长开拓了新的探测光谱带宽。 这些新增的带宽意味着在保持既定光谱间隔的同时,同一台仪器中可以测量更多参数。 这和降低数据变异系数是异曲同工的。

  光束质量决定了激光是否能在整个液流中产生近似均匀的光强。 其对仪器噪声的影响和靶细胞的大小相关。 细胞越小,在液流中的位置变化就会越大,对激发光的光束均匀性的要求也就越高光。 OBIS 激光器所输出的圆形输出光束,光束质量参数通常小于 1.2,即 M2 ≤1.2。 这非常适用于血细胞的计数。 相反,高 M2 会导致在近场和远场中产生不均匀模式。

  OBIS 激光器还提供不同的输出功率选项并支持直接调制,从而提高仪器处理速度并降低仪器使用的复杂性。

  优势

  无论仪器的设计和组装多么出色,其性能最终仍然取决于关键部件的性能。 激光器无疑是流式细胞术中极为关键的部件。 其性能绝不应成为提高数据变异系数的限制因素。 使用 OBIS 激光器可确保在严苛的临床和研究应用中获得优异的性能。

  应用领域

  多参数流式细胞术、免疫学、血液学、血液分析。

改善多参数流式细胞术中 数据变异系数

  图 1:在多参数仪器中,每类细胞会产生散布的数据点,称为“点状图”, 而非孤立的数据点。 图片由 IDEXX Laboratories, Inc. 提供。

改善多参数流式细胞术中 数据变异系数

  图 2:较大的 M2 会导致严重不规则的聚焦强度模式(上图)。 OBIS 激光器提供 M2 ≤1.2 以及圆形聚焦点(右图)。

改善多参数流式细胞术中 数据变异系数

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