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作者丨小柯
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近日,美国斯坦福大学Ali Cetin及其小组利用RecV重组酶系统,实现对单细胞或细胞群体的体内靶向光遗传学修饰。
相关论文于2020年3月23日在线发表在《自然—方法学》杂志上。
大脑回路包括大量具有不同分子、解剖和生理特性的神经元,它们相互连接。
为了能够靶向单个神经元靶向用于结构和功能研究,研究人员基于Cre、Dre和Flp(RecV)开发了光诱导位点特异性DNA重组酶。
RecV可在体内通过单光子或双光子光诱导来改变基因组修饰。
通过修饰小鼠和斑马鱼基因组中的多个基因座,这一技术可以对单个神经元产生靶向性、零散且明确的标记。
结合其他遗传策略,这一技术可以交叉靶向不同的神经元类别。
在小鼠皮层中,这一技术使零散标记以及单个神经元的全脑形态重建成为可能。
此外,这些酶可实现单细胞双光子靶向遗传修饰,并且可以与具有最小干扰的功能性光学指示剂组合使用。
总而言之,RecV可以实现时空精确的光遗传学修饰,并通过链接遗传身份、形态、连通性和功能,来促进对神经回路的单细胞分析。
相关论文:
https://www.nature.com/articles/s41592-020-0774-3
小柯报道:
http://news.sciencenet.cn/htmlpaper/2020/3/202032417224058755545.shtm
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